期刊信息
- 刊名： 河北师范大学学报（自然科学版）Journal of Hebei Normal University (Natural Science)
- 主办： 河北师范大学
- ISSN： 1000-5854
- CN： 13-1061/N
- 中国科技核心期刊
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表达FLP重组酶pCEP4-FLP载体的构建及其在FLP/FRT重组系统中的应用
- 吉林大学 畜牧兽医学院 动物胚胎工程吉林省重点实验室, 吉林 长春 130062
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DOI：
Construction of FLP Recombinase Expression Vector pCEP4-FLP and Its Application in FLP/FRT System
摘要/Abstract
构建重组载体pCEP4-FLP和pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP,重组载体pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP瞬时转染PK-15细胞24h后,再将重组载体pCEP4-FLP瞬时转染该细胞,利用荧光显微镜观察PK-15细胞GFP蛋白的表达情况,利用细胞流式技术统计绿色荧光蛋白表达效率.结果表明:重组载体pCEP4-FLP在细胞内能够表达FLP重组酶,并且表达的FLP重组酶能够识别FRT位点,删除两同向FRT位点间的DNA片段,为FLP/FRT位点特异性重组系统在转基因猪的应用奠定了基础.
The recombinant vectors pCEP4-FLP and pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP were transfected by pCEP4-FLP.The expression of EGFP were analyzed by fluorescence microscope.FACS analysis of the induction of EGFP expression.The recombinant vector pCEP4-FLP can express FLP recombinase which can recognize FRT sites and delete the DNA fra-1gment between two FRT sites in the same orientation.This system will be of great value for the applications of transgenic pigs.